代谢物鉴定通过将多重质量亏损过滤应用于LTQ Orbitrap XL™组合质谱仪(赛默飞世尔科技)的数据收集过程来执行。该质谱仪的特点是执行高能碰撞解离(HCD)进行裂解反应的碰撞室(图1)。高能碰撞解离能够提供线性离子阱中碰撞诱导解离之外的辅助裂解算途径。离子离开C-trap(见图1)后被加速,然后在充满氮气的HCD碰撞室裂解。因此而产生的碎片返回到C-trap,然后在仪器的质量分析器中被检测。这个技术产生丰富的“类似三重四极杆”裂解方式,包括对说明代谢物结构非常有用的低m/z质量范围的碎片。
图1:LTQ Orbitrap XL示意图,突出C-trap后面的HCD碰撞室。
伊立替康是一种被认可使用的治疗结肠和直肠癌的药物。用老鼠的肝脏细胞孵育伊立替康样品,再用带高能碰撞解离功能的LTQ Orbitrap XL仪器分析。收集潜在代谢物的碰撞诱导解离(CID)和高能碰撞诱导质谱图,并且用多重质量亏损过滤处理原始数据。